前言
基于已有的代谢组数据进行impact pathway富集气泡图与Venn图的绘制,用到的原始数据仅包括实验组和对照组的差异代谢物对应的KEGG号即可(或者差异代谢物名称也可),绘制成如下面这种效果图
Impact pathway富集气泡图的生成
代谢组数据分析
使用MetaboAnalyst5.0分析
- 进入 MetaboAnalyst5.0 点击主页中间的start直接开始
- 在内容选择界面选择
Pathway Analysis
- 进入之后选择
Compound List
,在输入框中粘贴差异代谢产物的KEGG号,并在Input type
部分选择KEGG ID
,这一步尽量直接用KEGG号,用差异代谢产物名称(相应选择Compound Name
)话因为有别名的存在,即你手里的产物名(公司库的名字)和KEGG库里的不一致,导致在下一步可能还需要核对更换,而KEGG号则是唯一的
- 等待录入匹配完成后会出现如下界面,可以看到都能匹配上则直接拉到最下面继续
Procced
(如果前一步被迫只能输产物名的话这一步还可以导出这个表格,得到对应的KEGG号,点击页面左下角的Download result
)
- 分析参数设置如果没有特别需求则选择默认设置就好,但是注意选择下面的
Pathway library
,根据实验涉及的物种进行选择,这里包含了常见的哺乳动物/鸟/与/昆虫/真菌/植物等,如果做的比较小众没有对应的则选择最相近的即可。比如我这里因为做的是奶牛则选择的Bos taurus(cow)
。
- 上一步继续后会生成如下结果,即我们需要的Impact pathway富集气泡图
- 点击左边
Show gridline
之后Update
可在图中显示网格线,便于更好的观察和认识结果 - 左边气泡图的具体含义:横坐标轴是表示影响大小,圆圈越大代表对这条通路的影响越大;纵轴是-log10(p),也就是p值可信度,圆圈越红代表可信度越高。每个圆圈对应的具体信息可查看下方表格
- 点击图片下方的
Pathway Name
这一系列的超链接,回载页面有图出现这一堆差异代谢物具体hit到了该pathway那些部分,已经简化的代谢通路图
- 点击左边
- 点击
Submit
之后会出现结果导出界面,建议直接选择打包下载也就是Download.zip
到本地,方便调看查阅
Impact pathway富集气泡图的加工
这里使用到的图片加工软件为Adobe Illustrator也就是AI
- 解压在MetaboAnalyst5.0得到的结果,选择
pathway_results.csv
文件打开
- 按
Raw p
升序排列,选取小于0.05的,K列的Impact
也可以作为参考值,一般大于0.1认为有影响(如果富集到的代谢通路少可以不考虑),按p值大小插入A列拉动排序,记得B列留空
- 打开AI后新建大小合适的画布,将文件
path_view_1_dpi72
导入AI,在上面的表格中复制A-C列,粘贴至图片右边,并对应表格中的p值和impact值确定圆圈含义,标记序号一一匹配即可(下图的示例图用的另一个表格的)
- 当impact pathway数量不多的时候也可以选择下面这种展示方式,更加直观
Venn图的绘制
Venn图数据整理
Excel初加工
- 将上面得到的每个比较组的impact pathway粘贴至新建的excel表格中,保存
使用在线Venn图工具分析
- 这里我用的是 联川生物云平台,进入主页注册账号后直接使用,目前免费。搜索Venn,选择如下普通的Venn图即可
- 进入页面后上传刚刚整理的excel表格,则会在右侧自动生成Venn图,对应的图片粗略细节调整可以参照下面箭头,比如调整圆圈颜色/标题位置/字体型号和大小等等
- 点击右侧保存数据注意,选择对应的文件类型后,图片和表格是分开保存的,一定记得都要下载
- 保存到本地的图片可以利用AI进行细化加工
效果图展示
对比开头我之前画的版本,这次写教程演示如下,再补充图例等细节就是完整的figure了。选用哪种按需即可,毕竟美化加工方面因人而异且各有所长。
本文作者:
twocanis
本文链接: https://twocanis.github.io/2022/03/20/%E7%BB%98%E5%88%B6%E5%B7%AE%E5%BC%82%E4%BB%A3%E8%B0%A2%E7%89%A9impact-pathway%E5%AF%8C%E9%9B%86%E6%B0%94%E6%B3%A1%E5%9B%BE/
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